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Addgene教您如何保存和使用质粒?

常见问题&FAQ

Addgene是如何制备穿刺菌的?

收到Addgene质粒后,您应该怎么处理?

Addgene推荐的细菌保存方法?

下面这个视频中就这些问题做了详细的说明。如果感兴趣,赶快点击视频学习吧!别忘记了把好东西分享哦!

 

 

穿刺菌的制备

 

Addgene质粒以穿刺菌的形式运输。Addgene的技术人员会在装有甘油菌的小管上打上二维的条形码,每个穿刺菌对应一个单独条形码,以保证质粒被正确运输。

Addgene技术人员用无菌牙签取一些库存细菌,然后接种形成穿刺菌。穿刺接种的细菌在温箱中孵育过夜(每个质粒的生长温度信息可以在Addgene官网上查询),并在第二天上午检查其是否生长,技术员应该在制备的穿刺菌表面上能看到细菌。条形码在包装时要再次扫描以确保科学家收到正确的质粒样品。

 

质粒培养方法

您收到穿刺菌后,应该在4摄氏度冰箱中存放您的质粒样品。并在两周内,在含有相应抗生素(每个质粒的抗生素信息可以在Addgene官网上查询)的琼脂平板上划线培养出单菌落。然后从一个单菌落中挑取细菌,接种到液体培养基中,依据Addgene网站上质粒的生长条件进行过夜培养。

 

保存细菌时,需要将300 ul细菌的液体培养物和300 ul 50%的甘油按照1:1比例混合制成甘油菌,储存在-80摄氏度冰箱中。甘油菌通常是长期存储质粒的一个好方法。此外,您可以使用细菌培养物提取质粒以备以后使用或存放。

 

更多信息,可以访问Addgene网站上的相关内容。

 

中源生物是Addgene公司授权的中国独家代理

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